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FM4-64具有亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部，具有三个双键。阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时，染料的水相部分没有荧光，而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后，在进行胞吞作用时，染料被包裹在囊泡内，因此，洗去细胞表面附着的染料后，荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少。反之，在胞吐作用时，染料与神经递质一起从囊泡释放，导致荧光信号减少。因此，荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率——“解离速率”因染料种类而异。通常，具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力，因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。

FM4-64是阳离子型苯乙烯基亲脂性的荧光染料，用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动；能够选择性地用红色荧光对酵母菌液泡膜进行染色，可用于观察液泡细胞器形态和动力学、研究胞吞途径以及筛选和表征酵母菌胞吞作用突变体。FM4-64染料不能用于固定细胞染色。

Abs/Em (in MeOH)：543/- nm,(emission in MeOH is too weak to measure)
Abs/Em (in membranes)：510/750nm
分子式：C30H45Br2N3
分子量：607.51

组分	250μg	1mg
FM4-64	411μL	1mg
说明书	1份	1份

保存：-20℃，避光，有效期1年。


本制品250μg规格是浓度为1mM的FM4-64母液，无需配制，可直接使用；1mg规格的是粉末装，配制方法如下：

• 将原产品管5000rpm离心1min；
  
• 将164.6μL的甲醇加入到原产品管中，吹打溶解后，即得10mM的储存液；
  
• 储存液于-20℃避光保存。

一、动物细胞样本
神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞囊泡。染色可以在4℃进行以选择性标记质膜；在室温或37℃下，染料的内吞通常在10min内发生。可以使用Tyrode溶液或其它缓冲液，可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒素(TTX)，其目的是阻断动作电位，防止染色后的突触囊泡释放。用于特定实验的最佳方案需要由实验者摸索。以盖玻片上培养的神经元细胞的神经末梢染色为例：

• 在50mM Tyrode溶液中稀释神经末梢染料至最终浓度为4μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中1min，使细胞完全浸没。
  
• 将盖玻片转移至Tyrode+0.5μM河豚毒素(TTX)溶液中，室温下孵育1min。
  
• 室温下，用Tyrode + 0.5μM TTX溶液反复多次洗涤盖玻片。
  
• 荧光显微镜下拍照观察。

二、植物细胞样本
以拟南芥原生质体为例：

• 拟南芥原生质体制备完成之后，使用终浓度为0.08%(v/v)的FM4-64染液对原生质体进行染色。
  
  • “0.08%(v/v)”代表着每100mL原生质体悬浮液中，加入0.08mL 10mM或者0.8mL 1mM的FM4-64染液。
• 室温条件下，在缓冲培养基中孵育10～15分钟，使其对细胞进行充分染色。
  
• 在荧光显微镜下，采用543nm的激发波长，580～650nm的发射波长(最大发射波长：640nm)观察染色效果并拍照。

相关搜索：FM4-64，动物细胞染色